La colorazione di Gram (o metodo di Gram) è un modo di classificare i batteri in due grandi gruppi: gram-positivi e gram-negativi. Il nome deriva dal suo inventore, Hans Christian Gram.
Il metodo di Gram macchia i batteri secondo le proprietà chimiche e fisiche delle loro pareti cellulari. In primo luogo, un colorante viola viene messo sui batteri. Questo colorante macchia il peptidoglicano, uno strato spesso che si trova solo nei batteri gram-positivi. Dopo la prima macchia, un'altra macchia (di solito safranina o fucsina) dà a tutti i batteri gram-negativi un colore rosso o rosa.
La colorazione di Gram è quasi sempre il primo passo nell'identificazione di un organismo batterico. Tuttavia, non tutti i batteri possono essere classificati con questa tecnica. I batteri per i quali il metodo non funziona sono chiamati "gram-variabili" o "gram-indeterminati".
Gram ha sviluppato la tecnica lavorando con un altro scienziato, Carl Friedländer in un ospedale di Berlino. Tuttavia, Gram ha usato il test per rendere i batteri nei polmoni più facili da vedere. Pubblicò il suo metodo finito nel 1884.

