Isabella di Castiglia (22 aprile 1451 - 26 novembre 1504) fu una regina di Castiglia e León. Era la figlia di Giovanni II di Castiglia e della sua seconda moglie Isabella del Portogallo.
Suo fratello, Enrique IV, che era il re di Castiglia, voleva farla sposare. Lei voleva sposare qualcuno del Portogallo per farsi un alleato politico. Sposò segretamente Ferdinando II d'Aragona nel 1469 ed ebbe cinque figli da lui. La più giovane fu Caterina d'Aragona, che sposò Enrico VIII d'Inghilterra nel 1509. Isabella era la nonna di Carlo I di Spagna (Carlo V, imperatore del Sacro Romano Impero).
Quando il fratello di Isabella morì, lei avrebbe dovuto essere la nuova regina. La figlia di suo fratello Enriques, Juana, voleva invece diventare regina. Dopo una guerra, Isabella divenne regina. Allo stesso tempo, il marito di Isabella, Ferdinando, divenne re d'Aragona. I due unirono le terre di Castiglia e Aragona nell'attuale Spagna. Isabella aiutò a pagare quattro viaggi di Cristoforo Colombo per trovare le Americhe. Ai loro tempi, le Americhe erano chiamate "Il Nuovo Mondo". Nel 1492 firmò una tregua che rese la Spagna un paese cristiano. Dopo la sua morte, sua figlia Giovanna di Castiglia divenne regina.
