Costrutto di DNA

Autore: Leandro Alegsa

20-04-2021

Un costrutto di DNA è un segmento di acido nucleico costruito artificialmente che sarà "trapiantato" in un tessuto o cellula bersaglio.

Spesso contiene un inserto di DNA, che contiene la sequenza genica che codifica una proteina di interesse. L'inserto di DNA è stato subclonato in un vettore di biologia molecolare.

Un costrutto di DNA può esprimere proteine wildtype o impedire l'espressione di certi geni esprimendo concorrenti o inibitori. Può esprimere proteine mutanti, come mutazioni di delezione o missenso. Un costrutto di DNA è spesso usato in biologia molecolare per analizzare più in dettaglio macromolecole come proteine o RNA.

Vettori di biologia molecolare

Un vettore di biologia molecolare è una molecola di DNA usata come veicolo per trasferire materiale genetico estraneo in un'altra cellula.

I principali tipi di vettori sono plasmidi, batteriofagi e altri virus, e cromosomi artificiali. Comune a tutti i vettori ingegnerizzati sono un'origine di replicazione, un sito di multiclonazione e un marcatore selezionabile.

Il vettore stesso è generalmente una sequenza di DNA che consiste in un inserto (transgene) e una sequenza più grande che serve come 'backbone' del vettore. La spina dorsale includerà geni di resistenza batterica per la crescita nei batteri e promotori per l'espressione nell'organismo.

Lo scopo di un vettore che trasferisce informazioni genetiche a un'altra cellula è tipicamente quello di isolare, moltiplicare o esprimere l'inserto nella cellula di destinazione.

L'inserimento di un vettore nella cellula bersaglio è solitamente chiamato trasformazione per le cellule batteriche, o trasfezione per le cellule eucariotiche. L'inserimento di un vettore virale è spesso chiamato trasduzione.

Ci sono due tipi di integrazione dei plasmidi in un batterio ospite: I plasmidi non integranti si replicano come nell'esempio superiore, mentre gli episomi, l'esempio inferiore, si integrano nel cromosoma dell'ospite.

Domande e risposte

D: Che cos'è un costrutto di DNA?

R: Un costrutto di DNA è un segmento di acido nucleico costruito artificialmente per essere trapiantato in un tessuto o in una cellula bersaglio.

D: Cosa contiene spesso un costrutto di DNA?

R: Un costrutto di DNA contiene spesso un inserto di DNA, che include la sequenza genica di una proteina di interesse.

D: Che cos'è un vettore di biologia molecolare?

R: Un vettore di biologia molecolare è un veicolo utilizzato per trasferire frammenti di DNA da una cellula all'altra.

D: In che modo un costrutto di DNA può impedire l'espressione di alcuni geni?

R: Un costrutto di DNA può esprimere competitori o inibitori che impediscono l'espressione di alcuni geni.

D: Quali tipi di proteine mutanti può esprimere un costrutto di DNA?

R: Un costrutto di DNA può esprimere proteine mutanti, come mutazioni di delezione o mutazioni missenso.

D: Qual è lo scopo dell'uso di un costrutto di DNA in biologia molecolare?

R: Lo scopo dell'uso di un costrutto di DNA in biologia molecolare è quello di analizzare in modo più dettagliato macromolecole come proteine o RNA.

D: Quali tipi di proteine può esprimere un costrutto di DNA?

R: Un costrutto di DNA può esprimere proteine wildtype, mutanti o concorrenti/inibitori.