Nel 340 a.C. Filippo radunò un grande esercito macedone e invase la Tracia. Lasciò al sedicenne Alessandro il potere di governare la Macedonia in sua assenza come reggente. Ma mentre l'esercito macedone avanzava in profondità in Tracia, la tribù tracia dei Maedi che confinava con la Macedonia nord-orientale si ribellò e rappresentò un pericolo per il paese. Alessandro radunò un esercito, lo guidò contro i ribelli e con una rapida azione sconfisse i Maedi, catturò la loro roccaforte e la ribattezzò Alexandropolis.
Alessandro divenne re di Macedonia nel 336 a.C. quando suo padre fu assassinato. Una riunione delle città greche lo nominò strategos (generale o comandante supremo). Usò questa autorità per lanciare i piani di espansione militare del padre. Nel 334 a.C. invase l'Asia Minore governata dai Persiani. Iniziò una serie di campagne che durarono dieci anni. Alessandro spezzò il potere della Persia in una serie di battaglie decisive, in particolare quelle di Issus e Gaugamela. Rovesciò il re persiano Dario III e conquistò l'intero imperopersiano. A quel punto l'impero di Alessandro si estendeva dal mare Adriatico al fiume Indo.
Attaccò l'India nel 326 a.C. e sconfisse il re Porus, che governava una regione del Punjab. In seguito divennero alleati. L'India a quel tempo era divisa in centinaia di regni. L'esercito si rifiutò di attraversare l'Indo e combattere i re dall'altra parte, così Alessandro li condusse fuori dall'India.
Alessandro morì a Babilonia nel 323 a.C., per cause sconosciute. Sono stati suggeriti il veleno, l'omicidio o una febbre dopo una battaglia. Alla sua morte stava pianificando una serie di campagne che sarebbero iniziate con un'invasione dell'Arabia. Negli anni successivi alla sua morte, una serie di guerre civili fece a pezzi il suo impero. Diversi stati furono allora governati dai Diadochi, i generali ed eredi superstiti di Alessandro. Essi combatterono e si conquistarono a vicenda. Il pezzo più grande sopravvissuto fu l'impero seleucide.
L'eredità di Alessandro include la diffusione culturale delle idee e della lingua macedone. Fondò una ventina di città che portavano il suo nome, in particolare Alessandria in Egitto. L'insediamento di coloni macedoni da parte di Alessandro portò a una nuova civiltà ellenistica. Segni di questo possono essere visti nell'impero bizantino nella metà del 15° secolo d.C. C'erano parlanti macedoni nell'Anatolia centrale e orientale fino agli anni '20.
Quando Alessandro morì aveva solo 32 anni.
